首先，在进行稀释操作时，需要确保使用的器具无菌，以避免外界污染影响实验结果。通常情况下，会使用无菌移液管从原始样本中吸取一定量的液体，然后将其加入到含有适量无菌水或其他稀释剂的试管或容器中，完成初步稀释。随着稀释次数的增加，每个单位体积内的细菌数目会显著降低。
接着，将经过不同倍数稀释后的样品均匀地涂抹在预先准备好的琼脂培养基表面上。为了保证每块平板上的菌落数目适中（一般建议控制在30至300之间），选择合适的稀释度至关重要。如果稀释度过高，则可能导致无法形成足够数量的菌落；反之，若稀释度过低，则可能因菌落过于密集而难以准确计数。
待培养基凝固后，将平板置于适宜条件下进行恒温培养。在此期间，细菌会在培养基上生长并繁殖，最终形成肉眼可见的菌落。当观察到清晰且独立分布的菌落时，即可开始计数工作。需要注意的是，在计数过程中应避免重复计算同一菌落，并尽量减少人为误差。
最后，根据记录下的菌落数目以及对应的稀释倍数，可以推算出原始样本中所含活菌的实际数量。这种方法不仅简单易行，而且能够提供较为精确的数据支持，因此被广泛应用于食品检测、环境监测以及医学研究等多个领域。当然，在实际应用中还需结合具体情况灵活调整操作步骤，以确保获得可靠的结果。
